Die RB32-Verbindung beginnt in Ludwigsfelde, einem Ort südlich von Berlin, und folgt von dort aus entlang der regional geprägten Landschaft Brandenburgs in Richtung der Hauptstadt. Die Fahrt führt durch sanfte Hügellandschaften, Felder, Wälder und kleinere Ortschaften, die typisch für die Gegend um Potsdam-Mittelmark und die südliche Randzone Berlins wirken. Auf dem Weg nach Norden durchquert der Zug verschiedene Bahnstrecken-Abschnitte, die die regionale Infrastruktur verknüpfen und so eine ruhige, dennoch verbindliche Verbindung zwischen dem ländlich geprägten Umland und der urbanen Ballungszone darstellen.

Am Endziel erreicht die Linie schließlich S+U Lichtenberg Bhf in Berlin, eine wichtige Vernetzungstelle im öffentlichen Nahverkehr. Für Reisende bedeutet diese Verbindung, dass das U- und S-Bahn-Netz nahtlos erreichbar wird, was Pendeln, Besuche oder Ausflüge in die Hauptstadt erleichtert. Die Route dient damit als Verbindung zwischen ländlicher Region und urbanem Zentrum, unterstützt durch eine regelmäßige Fahrplanführung, die den Alltag von Pendlern und Reisenden durch eine stabile, verlässliche Zugverbindung erleichtert.